Большинство исследовательских пептидов получают химическим синтезом. Такой способ позволяет собрать нужную последовательность аминокислот шаг за шагом и повторить её от партии к партии.
Твердофазный синтез
Основной метод — твердофазный синтез пептидов (SPPS). Первую аминокислоту закрепляют на частицах полимерной смолы, затем по одной присоединяют следующие. После каждого шага лишние реагенты смывают, поэтому растущая цепочка остаётся на подложке, а побочные вещества уходят с раствором. Когда последовательность собрана, пептид отщепляют от смолы.
Очистка и сушка
Сразу после синтеза в продукте есть укороченные цепочки и остатки реагентов. Их отделяют препаративной хроматографией: смесь проходит через колонку, и фракции с целевым пептидом собирают отдельно. Затем раствор замораживают и высушивают в вакууме — так получается лиофилизат, белый порошок, который стабильнее раствора при хранении.
Контроль партии
Перед выпуском каждую партию проверяют:
- подлинность — совпадает ли масса молекулы с расчётной (LC-MS);
- чистоту — какую долю составляет целевой пептид (HPLC);
- внешний вид и массу содержимого флакона;
- маркировку — номер партии, дату выпуска и срок годности.
Результаты сводят в сертификат анализа. Номер партии на упаковке связывает флакон с этим документом и с записями производства.
